（一）蔬菜中硝态氮的测定
一、目的意义
过量施用氮肥是影响蔬菜硝酸盐积累的主要因素。如何正确施用化肥，特别是氮素化肥，对于降低蔬菜硝酸盐含量、保护人体健康具有十分重要的意义。本实验通过蔬菜硝酸盐含量的测定，掌握酚二磺酸比色法测定蔬菜或其他农产品中硝态氮的测定原理和操作方法。
二、方法原理
在弱碱性条件下，用热水从样品中提取硝酸根离子，然后用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白，加活性炭去除叶绿素，过滤。滤液于水浴上蒸干，在无水条件下，与酚二磺酸作用，生成硝基酚二磺酸，该物质在弱碱性条件下生成黄色物质，定容后于波长420nm处比色测定，黄色深浅与硝态氮含量呈正相关。
酚二磺酸比色法测定硝态氮范围：0.1~2mg/L
三、实验材料
分别准备各类蔬菜样品500克，具体有叶菜类如小白菜；根菜类如芹菜；块茎类如白萝卜；瓜果类如黄瓜等。
四、仪器与试剂
1、需用的仪器
恒温水浴锅，722或723型分光光度计；玻璃研钵，100和200ml容量瓶，5ml～20ml刻度吸管，瓷蒸发皿等
2、需用的试剂
酚二磺酸，饱和硼砂溶液，0.25mol·L-1亚铁氰化钾溶液，1mol·L-1乙酸锌溶液，1︰1氨水，活性炭等。
五、操作步骤
1、样品的预处理
①分样：将上述蔬菜样品进行适当缩分至所需要量，并摘除不可食部位。
②样品洗涤：缩分后的样品先用自来水洗涤后，蒸馏水润洗2～3次（要求此过程迅速完成，不浸泡在水中清洗），然后用洁净纱布沾干。
③样品制备：上述样品用不锈钢刀切碎，混匀，备用。
2、样品中硝态氮提取
称取切碎后的蔬菜样品适量（一般叶菜类和根菜类取5g左右，块茎类取10～15g左右，瓜果类15～20g左右）于研钵中，加少许石英研磨成匀浆，加5ml饱和硼砂溶液，搅匀，用100ml70-80℃热水洗入200ml烧杯中，置于沸水浴中加热15分钟（加热过程不断搅拌），拿下冷却。加入10ml亚铁氰化钾，搅匀，加入10ml乙酸锌，搅匀，再加2g活性炭粉,搅匀，洗入200ml容量瓶中，定容，干过滤。同时做试剂空白1份。
3、溶液中硝态氮的定量测定
准确吸取上述滤液5.00ml于瓷蒸发皿中，加入0.05gCaCO3粉末，置于85-90℃水浴上蒸干，干后维持10分钟，冷却，迅速加入酚二磺酸试剂2ml,旋转蒸发皿，使试剂充分接触所有蒸干物，玻棒搅拌至蒸干物完全溶解，静置10分钟使之作用完全，加水20ml，冷却，缓慢加入1︰1NH4OH至溶液显黄色，再过量2ml，水洗入100ml容量瓶中定容，与标准硝态氮溶液于λ=420nm处比色测定。
4、硝态氮标准曲线绘制
分别吸取10.00mg/L标准硝态氮溶液0，1，2，5，10，15，20ml于蒸发皿中，再分别加入同待测体积的试剂空白溶液，以下步骤同“操作3中加入0.05gCaCO3粉末------”。
六、结果计算
蔬菜中NO
3-—N（mg/kg
鲜重）= ×4.43
CX：从标准曲线上查找的待测溶液浓度（mg/L）
V2：比色溶液体积（ml）
V1：待测溶液体积（ml）
VX：待测定量体积（ml）
m：蔬菜样品鲜重（g）
4.43：NO3-换算成NO3-—N系数
（二） 水体中硝态氮的测定
一、目的意义
水体污染指标中硝酸盐态氮是引起水体富营养化和影响饮用水质的重要指标之一。本实验通过水样硝酸盐态氮含量测定，掌握紫外分光光度法测定地下水等清洁水样中硝酸盐态氮的原理和操作方法。
二、方法原理
根据水样中的硝酸根离子在波长220nm产生吸收值，而在275nm不产生吸收值，然后将校正后的吸收值A=A220nm-2A275nm与标准溶液硝酸根离子进行比较，在一定范围内，校正后的硝酸根离子吸收值与硝态氮含量呈正相关，然后从标准曲线上查找对应硝酸根离子浓度，即可求算出水样中硝酸盐态氮含量。
紫外分光光度法测定硝态氮范围：0.08~4mg/L
三、实验材料
清洁地面水和未受明显污染的地下水。
四、仪器与试剂
1、需用的仪器
紫外分光光度计；50ml容量瓶，5～20ml刻度吸管等
2、需用的试剂
10%氨基磺酸，1MHCl
