一、实验目的 通过一对相对性状的遗传杂交实验,分析杂种后代的性状表现,验证分离规律。 通过两对相对性状的遗传杂交实验,分析杂种后代的性状表现,验证独立分配规律。并了解基因互作的现象。 二、实验原理 在减数分裂形成配子时,同源染色体上的等位基因,随所在染
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  • 孟德尔分离规律和自由组合规律的验证

  • 点击:    作者:   来源:湖南农大 日期:2007-12-07    本站论坛
一、实验目的
通过一对相对性状的遗传杂交实验,分析杂种后代的性状表现,验证分离规律。
通过两对相对性状的遗传杂交实验,分析杂种后代的性状表现,验证独立分配规律。并了解基因互作的现象。
二、实验原理
    在减数分裂形成配子时,同源染色体上的等位基因,随所在染色体的分离而分离。将具有一对相对性状差异的两个亲本杂交,其F1产生的雌雄配子各有两种,其比例为1:1,F2的表现型也是两种,其比例为3:1。
玉米的籽粒黄色和白色及种子胚乳糯性和非糯性为一对相对性状,一般由单基因控制。例如玉米籽粒的非糯性(WxWx)品种与糯性(wxwx)品种杂交,其F1的种子表现为非糯性的杂合体(Wxwx),当其花粉母细胞减数分裂形成配子时,这对等位基因分离,形成含有基因Wx或wx的花粉粒,具有非糯性基因Wx,产生直链淀粉,遇碘液呈蓝色;具有糯性基因wx,产生支链淀粉,遇碘液呈棕色。这两种花粉粒在数量上的理论比例为1:1。F1的雌雄配子相互受精结合,形成F2种子的非糯性对糯性比例为3:1。     
同时,在减数分裂过程中,位于非同源染色体上的两对等位基因在形成配子时,每对等位基因既随同源染色体的分离而分离,又随非同源染色体的重组而自由组合,形成四种基因型的配子,其比例相等。因此,两对基因的杂合体在完全显性的条件下,其自交子代的表现型分离比例为9:3:3:1,测交子代的表现型分离比例为1:1:1:1。如果基因间发生互作,则随着互作方式的不同,产生的表现型分离比例有所不同。
玉米籽粒是由果皮、胚乳和胚三部分组成,其中胚乳包括糊粉层和淀粉层。如图:
已知控制玉米籽粒各种性状的基因,具有下列的遗传表现。果皮颜色性状有红色、棕色和无色。在基本色素基因A1存在时,果皮颜色的表现一般是由P和BP两对基因互作的结果。
    胚乳性状有非甜粒和甜粒,非甜粒外形饱满,甜籽粒外形皱缩。已知皱缩性状是受位于第6染色体上的隐性基因su所控制。
    糊粉层颜色性状有紫色、红色和无色。它主要由7对基因 (花青素基因:Alal、A2a2、A3a3;糊粉粒色基因:Cc、Rr、PrPr;色素抑制基因:Ii) 所控制。只有当显性基因Al、A2、A3、C、R同时存在、而抑制基因又呈隐性纯合ii时,色素才能形成。而色素形成的类别是由Prpr决定的,当显性基因Pr存在时,呈现为紫色,当隐性基因纯合prpr存在时则表现为红色。当显性基因A1、A2、A3、C、R中缺少任何一个或所有这些色素基因均为显性,但当显性抑制基因I存在时,均表现为无色。
    由于控制玉米籽粒、果皮和糊粉层颜色,以及胚乳性状的基因分别位于非同源染色体上,故这些性状的遗传表现为独立分配和基因互作现象。
三、实验材料
玉米(Zeamays):多79(黄色,非糯)
多67-1(白色,糯)
多79×多67-1F1自交的果穗。
玉米(Zeamays)果穗:PC5-2 (黄色、非糯性、硬粒)
                                2041  (白色、糯性、硬粒)
PC5-2  2041 F1植株的自交果穗;
四、实验用具
多媒体演示系统、显微镜、培养皿、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、玻棒、培养箱、计算器、计数器。
五、药品试剂  
碘、碘化钾、酒精、冰醋酸。
1%碘—碘化钾溶液的配制:取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,加入1g金属碘,待其溶解后再加入295ml蒸馏水,保存于棕色瓶中。
六、实验步骤
 (一)分离规律验证
观察玉米花粉粒:从多79×多67-1 F1植株上取1枚花药(于散粉前,把雄花序放入卡诺氏液固定,70%酒精中保存备用)放在载玻片上,用镊子(或解剖针)将花粉粒压出,散开,加1滴1%碘-碘化钾液染色,盖上盖玻片。在低倍镜下(10 X 4倍)观察花粉粒的染色反应,并记录10个视野下蓝色与棕色的花粉粒数。
     玉米籽粒黄色和白色的分离及种子胚乳糯性和非糯性:玉米籽粒黄色对白色为显性,胚乳非糯性对糯性为显性。每人取玉米杂合体F1植株上自交的果穗,按籽粒颜色及糯性计数各果穗上黄色粒数和白色数,非糯性粒数和糯性粒数。最后按各小组观察的数据汇总进行统计分析。
为了验证分离规律,对所观察的资料须按下式进行X2(卡方)测验。
    X2=∑(O-E)2∕E
    上式中,O:为实际观察数,E:为预期理论数,∑为各项总和。
    求得X2值后,根据自由度df (即分离类型组数N减去1),查X2值表(附录),求出概率值P。再根据P值决定实得结果与理论数是否有显著差异。PO.05,则表示差异不显著,即说明实际观察数符合预期理论数。
(二)自由组合规律验证
    配制玉米自交系PC5-2和自交系2041,将自交系(PC5-2×20414)杂交,产生杂交F1植株的自交果穗,观察果穗上籽粒性状的分离现象。每一果穗的籽粒表现是:有色、非糯,有色、糯性,白色、非糯,白色、糯性,四种表现型。每位(或两位)同学统计一果穗,各组统计实验结果,最后全班汇总,进行X

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