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  • 病理制片程序

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-04-09    本站论坛

4.Carazzi氏苏木素(1911)
苏木素 0.5g
甘油 100ml
硫酸铝钾 25g
蒸馏水 400ml
碘化钾 0.1g
将苏木素溶于甘油,硫酸铝钾溶于300ml的蒸馏水中搅拌至完全溶解后,混合两液,将碘化钾溶于剩余的100ml蒸馏水中,加温到溶解后,混合于上述的混合液中,搅拌均匀,过滤后即可使用,染色时间10min左右,配成后的液体可保存半年左右。
5.Cole氏苏木素(1943)
苏木素 1.5g
饱合硫酸铝钾水溶液 700ml
碘酒(1克碘溶于95%酒精99ml中) 50ml
蒸馏水 250ml
将苏木素溶于加温的蒸馏水中,然后加入碘酒溶液,继而加入饱和硫酸铝钾溶液,混和均匀后加热,直至沸腾,将瓶子插入预备的冰水中,如同配制Hari氏苏木素一样,第二天过滤,即可使用,染色时间为20min以上。

 

 


 


(2)铁苏木素
1.Weigert氏铁苏木素
A液: 苏木素 1g
无水酒精 100ml
将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%的苏木素酒精配制,即时可用。
B液: 29%三氯化铁水溶液 4ml
蒸馏水 95ml
盐酸 1ml
临用时,取A液和B液等份混合,即可使用,在4小时内使用完毕,如果超时,这种试剂便过分氧化而失效。因此,每次使用,需要多少配制多少,采取一次性用完,以免造成浪费。该染液具有抗弱酸的能力,因此,常用于某些特殊染色核的染色,染色时间为20-30分钟。
2.Heidenhain氏铁苏木素(1896)
A液: 苏木素 0.5g
无水酒精 10ml
蒸馏水 90ml
将苏木素溶于无水酒精,然后再加入蒸馏水,放置四周后便可成熟。
B液: 硫酸铁铵 5g
蒸馏水 100ml
这种铁苏木素可以显示多种物质如:横纹肌、髓鞘、线粒体、细胞核等,可被染为深灰色至黑色。
(3)钨苏木素
磷钨酸苏木素(PTAH)
苏木素    0.5g
磷钨酸 5g
蒸馏水 500ml
取300ml蒸馏水来溶解苏木素,其余的蒸馏水溶解磷钨酸,然后两者混合在一起,搅拌均匀后放于亮处,约四周左右才可成熟使用。
该试剂可以显示多种物质,如:横纹肌、神经胶质细胞、纤维、纤维素、髓鞘、胶厚,和细胞浆等,染色时间24小时以上。
这种试剂配成后,可连续使用达数年时间。
(4)钼苏木素
磷钼酸苏木素(Thomas, 1941)
A液: 苏木素    2.5g
二噁烷    49ml
过氧化氢 1ml
B液: 磷钼酸 16.5g
    蒸馏水    44ml
    二甘醇    11ml
将B液过滤,取滤液50ml加到A液中去,充分混合后,可见该试剂为深紫色,放置24小时后,才可使用。染色时间2分钟。它可显示的物质为:胶原及粗的网状纤维;亲银细胞;核、Daneth氏细胞等。
(5)铅苏木素(Solcia等,1969)
硝酸铅苏木素
A液: 1.5克苏木素溶于10ml 95%酒精中,取 1.5ml
    硝酸铅贮存液             10ml
蒸馏水 10ml
混合上述液体,搅拌均匀后,静置30分钟后过滤。
B液: 5%硝酸铅水溶液            50ml
饱和醋酸铵水溶液 50ml
混合两液,过滤,再加入甲醛2ml。
将A和B液混合,反复搅拌后放置30分钟,过滤后可使用。染色时间37℃ 2-3小时,45℃ 1-2小时。
该试剂可将内分泌颗粒和APUD细胞颗粒显示出来,同时也可把肌肉和神经等显示出来。
(十一)伊红染液的配制
在普通染色法中,有了细胞核的染色还不够,还不能完整地显示整个细胞来,只有同时将细胞浆显示出来,细胞才完整。因此伊红的染色也与苏木素同等重要,就如同人的左右臂,缺一不可。
配制伊红,有许多种方法,根据各单位的情况,使用不同种类的伊红。
市售的伊红有两种:一是水溶性伊红,二是醇溶性伊红,在我们的实践中,水溶性伊红用低浓度的酒精来配制,只要配制得当,其效果非常好。
伊红       1g
70-75%酒精    100ml
先将伊红用蒸馏水(少许)调成浆糊状,再加入酒精,边加边搅拌,直到彻底溶解,此时试剂有些混浊,取少许冰醋酸,加入到试剂中去,试剂逐渐转变为清亮,呈鲜红色,染出切片,效果很好。

 

 


 


二、超声波快速石蜡制片法
临床活检,用常规石蜡制片法制作,病理报告如没特殊情况,一般都需要三天才能发出。其程序基本是活检当天下午取材,晚上组织脱水及浸蜡,第二天上午包埋切片及染色,当切片送达医生手里时,已是第二天的上午,下午看阅切片,至复检医生手里时,已是第三天的时间了。这是一般的工作时间,可这对于急需获得病理结果的患者来说,三天时间确实太长,尤其是门诊病人,远道求医的患者,或者外地甚至国外的患者,三天的时间就意味着等待,住宿及消费。为了解决上述的问题,减少患者的经济负担,为患者蠃来保贵的治疗时间,超声波快速石蜡制片法可胜任此项工作。
超声波的工作原理:超声波的高频振谐下以每秒80万次作缩张运动,在此掁谐下,也促进了被超声波所作用的试剂中分子的运动。由于分子运动加快,加速了组织与各种试剂的反应,使整个操作程序在短时间内完成。
超声波快速石蜡制片法程序:
几种不同组织处理时间表(mins)
步骤与试剂 肠粘膜 鼻咽部粘膜宫内膜等, 胶原纤维较多组织
1.10%缓冲褔尔马林 4 5 10
2.丙 酮 3 5-7 10
3.丙 酮 3 5-7 10
4.二 甲 苯 3 5-7 10
5.石 蜡 5 7-10 15
(3)注意事项:
1.本法中所用的脱水剂为丙酮,它比酒精具有更强的脱水作用。虽然从理论上讲,它对组织具有很强的收缩作用,但为了能在短时间内使组织能够彻底脱水,不得不首选它。从已做的近千例次的实验中认为,它与常规切片相比较,没有什么区别。

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