号针头,不可太细。需加注意的是,兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩,因此采血前必须使兔耳充血。当动脉扩张,未发生痉挛性收缩前立即进行抽血,时间过长,动脉会发生较长时间的收缩,采血难以进行。
此外,兔还可采用股静脉、颈静脉、股动脉及颈总动脉采血,一般需进行动、静脉分离术,而后采血。
小白鼠和大白鼠的颈静脉或颈动脉采血法:将鼠麻醉后背位固定于手术台上,剪去一侧颈部外侧的被毛,做常规颈静脉和颈动脉分离术。用注射器针头沿向心方向平行刺入血管,抽取所需血量。此法采血量:体重20g小白鼠可采血0.6ml左右;体重300g大白鼠可采血8ml左右。同法也可选用股动脉或股静脉采血。
尾静脉采血:将鼠放入固定筒内,露出鼠尾用手揉擦或温水(45—50℃)加温鼠尾,也可用二甲苯等涂擦鼠尾,使尾静脉充血。用剪刀剪断尾尖(小白鼠约1—2mm,大白鼠约5—10mm)后,即可流出血液。如血流不畅,可用手轻轻从尾根部向尾尖部挤压数次,可采到数滴血液。如实验需要间隔一段时间而多次采血时,每次采血可将鼠尾剪去很小一段,采血后,用棉球压迫止血,并立即用0.6ml液体火棉胶涂于尾部伤口处,使之结一层火棉胶膜,以保护伤口。此外,也可采用尾静脉交替切割法进行间隔、多次性采血。方法是用锋利手术刀片在尾部切一小口,切破一段尾静脉,血液即由伤口流出。此法每次可采0.3—0.5ml血液。可供一般血常规实验。尾部的3条静脉可交替切割,并由尾尖部向尾根部逐次切割,以保证连续多次使用。切割后用棉球压迫止血,约3天后即可结痂痊愈。此法在大白鼠采血是较为常用,效果较好。
(2)心脏采血:将兔背位固定,剪去左侧胸部相当于心脏部位的被毛,用碘酒和酒精消毒皮肤,选择心脏跳动最明显处作穿刺。一般有胸骨左缘外3mm处刺入第3肋间隙;穿刺时,最好用左手触诊心脏,以作配合。当针头接近心脏时就会感到心脏的跳动,这时需将针头再向里穿刺,便可进入心室。由于心脏的搏动,血液会进入注射器。如认为针头已进入心脏,但抽不出血液,可把针头稍微退出或前进一些。心脏采血经6—7天后,可以重复进行。采血量:在兔一次可去血液20—25ml.
7、动物处死方法:
(1)脊柱脱臼法 用左手拇指和食指捏住小白鼠头的后部,并用力下压,右手抓住鼠尾,用力向后上方拉,即可使颈椎脱臼,瞬间死亡(图)。
(2)空气栓塞法 像动物静脉内注入一定量的空气,使之发生栓塞而死亡。兔一般选用耳缘静脉。兔静脉内注入20—40ml空气即可致死。
(3)放血致死法 轻度麻醉动物后,固定于手术台上,行股部手术。暴露股三角区,分离股动脉(向心端用动脉夹夹住),并插入一根塑料管。打开动脉夹,使血液流入容器内,一般动物3—5min内即可致死。除股动脉外,常用颈总动脉放血。此法处死动物较为安静,对内脏器官无损伤,使采集病理切片标本,同时采集血液的一种较好的方法。兔可以采用此法处死。
第五节 常用仪器
一、电极
1、普通电极:多用银丝或不锈钢丝制成,一般将一条或两条金属丝镶嵌在有机玻璃或硬塑框套内,刺激端裸露,作为细胞外刺激用。
2、保护电极:保护电极的绝缘框套在刺激端弯曲成钩状,金属丝包埋其中,金属丝仅保留沟内一面裸露,以便施加刺激时,保护其周围的组织免受刺激。
3、锌铜弓:在生理学实验中,锌铜弓是检验标本机能活性最常用而简易的刺激器。由铜片和锌片两种金属制成。最早由
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