[实验目的]
学习记录哺乳动物动脉血压的直接测定方法,并观察神经-体液因素对心血管活动的调节。
[实验原理]
在正常生理情况下,心血管活动受神经、体液和自身机制的调节。
心脏受交感神经和副交感神经的支配。心交感神经兴奋时,使心率加快、心肌收缩力加强,心内兴奋传导加快,心输出量增加、动脉血压升高。心迷走神经兴奋时,使心率减慢、心房肌收缩力减弱、房室传导减慢,从而使心输出量减少、动脉血压下降。在神经调节中以颈动脉窦-主动脉弓的减压反射尤为重要,当动脉血压升高时,压力感受器发放冲动增加,通过中枢反射性引起心率减慢、心肌收缩力减弱、心输出量下降、血管舒张和外周阻力降低,使血压降低。反之,当动脉压下降时,压力感受器发放冲动减少,神经调节过程又使血压回升。支配血管的交感缩血管神经兴奋时,使血管收缩、外周阻力增加、动脉血压升高。
家兔的压力感受器的传入神经在颈部从迷走神经分出,自成一支,称为减压神经,其传入冲动随血压变化而变化。
心血管活动还受肾上腺素和去甲肾上腺素等体液因素的调节。它们对心血管的作用既有共性,又有特殊性。关键取决于心、血管壁上哪一种受体占优势。肾上腺素对α与β受体均有激活作用,去甲肾上腺素主要激活α受体而对β受体作用很小,因而使外周阻力增加,动脉血压升高,但对心脏的作用要比肾上腺素弱。
[实验对象]
家兔。
[实验药品]
生理盐水,20%氨基甲酸乙脂(或3%戊巴比妥钠),肝素(500 U·ml-1),1: 10000肾上腺素,1: 10000去甲肾上腺素,1: 10000乙酰胆碱。
[仪器与器械]
计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪、刺激器),兔手术台,手术器械一套,气管插管,动脉夹,动脉套管、血压换能器,保护电极,棉线,纱布,棉球、注射器(50、10、2 ml),支架,双凹夹。 [实验方法与步骤]
1.实验准备:
(1)麻醉和固定:家兔称重后,耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯(5 ml·kg-1)或3%戊巴比妥钠(1 ml·kg-1)进行麻醉。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物已被麻醉,即可停止注射。将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。
图7.10-1 兔左侧内脏大神经的解剖位置
(2)分离颈部神经、血管和插气管插管 颈部剪毛,沿颈部正中线切开皮肤5~7 cm,用止血钳钝性分离皮下组织及浅层肌肉,暴露和分离气管;分离左、右两侧颈总动脉(左颈总动脉尽量分离长些,以做动脉插管用。当向头端追索到甲状软骨上缘,可见到左颈动脉分支为颈外和颈内动脉,在颈内动脉基部有一膨大处,为颈动脉窦。);分离右侧的迷走神经、交感神经和减压神经。在分离的气管、颈总动脉及神经下方各穿一不同颜色的线备用(见3.7.4)。并在减压神经下放一钩状记录电极,实验过程中将电极悬空(但不要拉得过紧)。将神经周围的皮肤提起做一皮兜,在神经表面滴上38℃液体石蜡,以防止神经干燥,并起到绝缘效果。
(3)进行气管插管(见3.7.4)
(4)分离内脏大神经(此步也可放在刺激内脏大神经前进行):将动物右侧卧位,在腰三角作一长4~5 cm的斜行切口,逐层分离至腹膜处,从左侧腹后壁(或沿腹中线切开皮肤)找到左肾,并将左肾向下推压,在其右上方可见一浅黄色黄豆粒大小的肾上腺。沿肾上腺上方可见内脏大神经(图7.10-1),小心分离主干,在其下方穿一丝线,并安放好保护电极备用。
(5)插动脉插管:做插管手术前经耳缘静脉注射肝素(500 U·(kg体重)-1),在左侧颈总动脉插入动脉插管(见3.7.4)。
2.连接实验装置:
(1)二道生理记录仪 将血压换能器固定在支架上,并与二道生理记录仪的血压放大器输入端相连。调整记录仪,对血压放大器定标。校正选择调至13.3 kPa(100 mmHg),灵敏度置于50,记录笔上移2 cm。
(2)计算机生物信号采集处理系统 将动脉插管通过三通与血压换能器连接,血压换能器与计算机生物信号采集处理系统的压力通道连接;刺激电极与系统的刺激输出连接;减压神经的记录电极导线与系统的一个通道连结。
启动计算机生物信号采集处理分析系统,按系统程序提示进行血压信号定标,调整放大增益。
3.
实验项目 (1)记录正常情况下减压神经放电波形和动脉血压波形,观察二者变化关系
注意观察减压神经的群集性放电与血压的波动是否同步?每一群集性放电持续时间?血压正常值是多少?同时辨认血压波的一级波和二级波,三级波(图7.10-2): 一级波(心搏波),
由心室舒缩活动所引起的血压波动,心缩时上升,心舒时下降,其频率与心率一致。二级波(呼吸波),由呼吸运动所引起的血压波动,吸气时血压先下降,继而上升,呼气时血压先上升,继而下降,其频率与呼吸频率一致。三级波,不常出现,可能由心血管中枢的紧张性活动的周期变化所致。
(2)夹闭颈总动脉 用动脉夹夹闭右侧颈总动脉10~15 s,观察血压与减压神经放电的变化。在出现一段明显变化后,突然放开动脉夹,血压又有何变化。
(3)牵拉颈总动脉 手持左侧颈总动脉上的远心端结扎线,向心脏方快速牵拉3 s。观察血压与减压神经放电的变化。若持续牵拉,血压与减压神经放电会有何变化?
(4)静脉注射乙酰胆碱 待血压基本稳定后, 由耳缘静脉注入1:10000乙酰胆碱0.2~0.3 ml,观测血压与减压神经放电的变化。注意动脉血压降低到何种程度时,群集型放电才减少?或完全停止及其恢复过程(图7.10-3)。
(5)静脉注射去甲肾上腺素 待血压基本稳定后,由耳缘静脉注入1:10000去甲肾上腺素0.2~0.3 ml,观测血压与减压神经放电的变化。注意何时冲动发放增多?何时分辨不出群集形式?直到血压继续增加而发放冲动的频率不再增加(图7.10-4)。
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