鱼类心脏的期前收缩与代偿间歇

［实验目的］
　　1.学习鱼类心脏活动曲线的描记方法。
　　2.验证心动周期中心脏兴奋性变化的规律及有效不应期长的特点。
［实验原理］
　　鱼类的心肌与其它动物的心肌一样,其兴奋后具有较长的不应期(见实验5.4)。同样在心脏的收缩期和舒张早期，任何刺激均不能引起心肌兴奋与收缩，而在心肌舒张早期以后，正常节律性兴奋到达之前，给心脏施加一个阈上刺激就能引起一次提前出现的心肌收缩，称为“期前收缩”或“额外收缩”。同理，期前收缩也有一个较长的不应期，因此，如果下一次正常的窦性节律性兴奋到达时，正好落在期前收缩的有效不应期内，就不能引起心肌收缩。这样，期前收缩之后往往出现一个较长时间的间歇期，称为“代偿间歇”。
［实验对象］
　　黄鳝或鲤、鯽等鱼类
［实验药品］
　　任氏液、妥开利（或其它肌松剂、MS222），鱼心脏灌流液（见附录）。
［仪器与器械］
　　滴管、蛙类常用手术器械、玻璃分针、木板条、大头钉、蛙心夹、蛙心套管、细钢丝、纱布、双极刺激电极、橡皮泥或电极支架、铁支架、生物信号采集与处理系统（或二道生理记录仪、刺激器）、张力换能器等。 ［实验方法与步骤］
　　1.标本的制备
　　(1) 在体黄鳝心脏标本
　　①破坏脑和脊髓 用纱布裹住黄鳝的身体，露出头。从枕骨与脊椎交界处剪断脊柱（不要太深，以免剪断腹面的血管），此时可见白色脊髓。用一细钢丝插入椎管，前后移动，顺势深入(插入椎管的感觉是钢丝前进时有阻力)，可见钢丝所到处的肌肉松弛。钢丝插入深浅视鱼体大小而定，约为峡部（两鳃盖之间的部位）到肛门长度的1/2～3/4。
　　②观察黄鳝的心脏构造 黄鳝的心脏属于一心房（耳），一心室（图7.2-1）。从心脏的腹面可以看到圆锥形、肌肉壁肥厚，收缩有力的心室。在心室的前方有一球形的膨大，叫动脉球。动脉球的壁含有丰富的弹性纤维，具有很大的弹性，动脉球背侧及两侧被心房的附属物—上心耳（房）垂包裹着。动脉球向前延伸为腹主动脉。用玻璃分针将心脏拨向一侧，可以看到心脏的背侧面，从背面可以看到心房（耳）。黄鳝的心房呈“H”形，壁薄，它的中央部分正在静脉窦的腹侧面，在前面和后面两个方向上有两对附属物叫心耳（房）垂，上心耳（房）垂包在动脉球的背外侧，下心耳（房）垂位于心室的背外侧面。心房的腹壁只有一个房室孔与心室相通。
　　静脉窦位于心房的背侧面，是一个壁薄并呈长形的囊，其背侧壁折叠形成一条很浅的纵行沟，将静脉窦的背侧表面分成两等份。右颈静脉和肾间静脉开口于静脉窦右边背侧部分，它们几乎是头尾相接，在同一个纵行方向上平行进入静脉窦，左颈静脉和肝静脉以同样的方式开口于静脉窦的左边。静脉窦通过横向的窦房孔与心房相通。
　　③在心室舒张期将一连有细线的蛙心夹夹住心尖备用。
　　（2） 鲤、鯽等鱼类离体心脏标本的制作：
　　将鱼注射肌松剂（箭毒或妥开利，肌肉注射0.1～0.4 mg·kg-1，或用MS222麻醉）之后，侧卧在塘瓷盘中。用粗剪刀剪断围心腔的肩带和舌基骨并除去，剪开心包膜暴露心脏。分离出动脉球和腹主动脉，并在动脉球下穿两根线，一根结扎腹主动脉，另一根线打一活结备用（图7.2-2）。
　　用眼科剪在心腹隔膜后方剪开进入静脉窦的静脉放血，用鱼用心脏灌流液冲去血液，以棉球沾干(也可不进行此步)。提起结扎线将动脉球固定，并在动脉球上剪一向心的斜行切口，将充有鱼用心脏灌流液的蛙心套管插入动脉球并向前伸入心室。将套管内的血液吸出，并用鱼用心脏灌流液冲洗数次，束紧备用的活结，固定套管。

剪断腹主动脉，提起套管，提起心脏,用线尽量远离静脉窦将其他血管结扎。在结扎外方剪断各组织。此时心脏完全离体，借灌流液而正常搏动。即可开始实验。

　　2.连接实验装置
　　按图7.2-3（或图7.2-4），将蛙心夹上的细线与张力换能器相连，让心脏搏动信号传入二道生理记录仪或计算机生物信号采集处理系统输入通道。将双极刺激电极与心室接触良好并固定稳妥后，与刺激器的刺激输出连接。

　　若使用二道生理记录仪，刺激器与记录仪分开时，还需将刺激器的触发信号输入二道生理记录仪的标记外接，以作为刺激标记。

3. 实验项目
　　（1）描记正常心搏曲线，观察曲线的收缩相和舒张相。
　　图7.2-4离体心脏期前收缩与代偿间歇实验装置图
　　（2）用中等强度的单个阈上刺激分别在心室收缩期或舒张早期刺激心室，观察能否引起期前收缩。
　　（3）用同等强度的单个阈上刺激在心室舒张早期之后的不同时段刺激心室，观察有无期前收缩出现。
　　（4）以上刺激若能引起期前收缩，观察其后有无代偿间歇出现（图7.2-5）。
［注意事项］
　　1.经常给心脏滴加灌流用的生理盐水，以保持心脏适宜的环境。
　　2.采用二道生理记录仪时，注意仪器接地。
　　3.张力传感器与蛙心夹之间的细线应保持适宜的紧张度。
　　4.双极刺激电极与心室接触良好的同时，还应尽量不让其阻碍心脏的自发收缩。
　　5.谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。
[实验结果]
　　剪贴记录曲线,做好标记,并分析讨论之。