8.将DNA-prep Tube置于2-ml Microfuge Tube中,将步骤4 中的上清加入DNA-prep Tube 中,5,500rpm 离心1m。 9.弃滤液,将DNA-prep Tube置回到原2-ml Microfuge Tube中,加入500ul BufferW1,5,500rpm 离心1m。 10.弃滤液,将DNA-prep Tube 置回到原2-ml Microfuge Tube 中,加入500ul BufferW2,5,500rpm离心1m。重复一次。 11.弃滤液,将DNA-prep Tube 置回到原2-ml Microfuge Tube 中,12,000rpm 离心2m,去除Silica 膜上残余的试剂。 12.将DNA-prep Tube 置于一洁净的1.5ml EP 管中,在Silica 膜中央加60ul Eluent,室温静置2m,12,000rpm 离心1m,洗脱质粒DNA。
四、质粒DNA 的琼脂糖凝胶检测 (一)仪器 冰箱 高速离心机 琼脂糖凝胶电泳系统 凝胶成像仪或紫外检测仪 (二)器皿 微量取样器 离心管 Eppendorf管 (三)试剂 (同实验一的琼脂糖凝胶电泳试剂) (四)实验步骤 配好琼脂糖凝胶(0.8%),取5 微升含有质粒DNA 的洗脱样品和Mark 分别点样,检测质粒DNA 的纯度和浓度。 五、结果分析 从电泳图谱上,观察所抽提到的质粒DNA 的纯度和浓度。
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