Q: 合成的引物进行PCR反应时无目的带，怎么办?
A: PCR反应失败的原因很多，可以从以下几个方面考虑。
1. 引物和模板是否配对，同源性有多大?
2. 引物本身是否有立体结构，或者二条引物之间是否形成高次结构?
3. PCR反应用试剂是否能正常工作?
4. PCR仪是否工作正常?
5. PCR反应条件是否合适?
如果一切正常，还无法解决问题时，我们可以免费重新合成引物。
如果重新合成的引物也无法解决问题时，请把引物和模板寄送给我们公司，我们可以帮助摸索PCR反应条件。
Q: 进行反义DNA (Antisense DNA) 实验时，是否要对DNA链全部进行S化修饰?
A: DNA经S化修饰后比较稳定，在细胞中不会被核酸酶等分解。如果整条链全部修饰成S化DNA，的确能增加DNA的稳定性，但此时会降低DNA和目的模板结合的效率。因此，现在一般的科研人员通常采用将DNA片段两端的数个碱基进行S化修饰，这样既能取得保护DNA的效果，又能增加Antisense DNA和目的模板的结合能力。
即使如此，现在还是有很多科研人员采用了全部S化的修饰方法，并且能得到非常良好的实验结果。因此，任何一项科研工作都不是绝对的，因根据具体情况设计实验方案。
Q: Biotin标记有三种，它们之间有何不同?
A: ss-Biotin可提供比较长的连接臂（臂长约24.3 A），方便了Biotin与Avidin间的结合，而且分子中含有S-S键，除可以用8M盐酸胍（pH1.5）分离Biotin与Avidin外，还可以使用还原剂（50mM DTT或100mM巯基乙酸）进行分离。Imino-Biotin可提供较短的连接臂（约13.5A），其最大特点是Biotin与Avidin的分离可在较温和的条件下进行；8M盐酸胍（pH4.0）。普通的Biotin提供与ss-Biotin相似长度的连接臂，但只能用8M盐酸胍（pH1.5）分离Biotin与Avidin。
Q: FITC、6-FAM、5-FAM标记之间有何区别?
A： 它们皆是荧光素标记（Fluorescein)，三者结构间的区别如下：
从结构图可见，5-FAM与6-FAM互为异构体；而FITC则在与oligo的连接方式上（硫脲键）有别于前者（酰胺键)，但它们的发色团均为荧光素，通常使用中没有区别。
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