连接酶简介

T4DNA连接酶连接要求和结果

外源DNA末端性质	连接要求	连接结果
不对称粘性末端	两种限制酶消化后，需纯化载体以提高连接效率	载体与外源DNA连接处的限制酶切位点常可保留；非重组克隆的背景较低；外源DNA可以定向插入到载体中。
对称性粘性末端	线形载体DNA常需磷酸酶脱磷处理	载体与外源DNA连接处的限制酶切位点常可保留；重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝；外源DNA会以两个方向插入到载体中。
平端	要求高浓度的DNA和连接酶	载体与外源DNA连接处的限制酶切位点消失；重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝；非重组克隆的背景较高 。