该法是Ｒ．Ｔreisman尚未发表的方法，同时也是Brinboim和Ｄoly(1979)及Ｉsh-Horowicz和Burke(1981)所用方法的改进。该方法对于目前使用的所有大肠菌菌株都卓有成效，并可与随后的纯化步骤，如聚乙二醇沉淀或氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心等，一并联合使用。注：括号中给出的体积可适用于未经氯霉素处理的培养。
试验准备：1、 溶液Ｉ：50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(pH8.0)溶液Ｉ可成批配制，在10 lbf/in2(6.895x104Pa)高压下蒸气灭菌15min，贮存于４℃。
2、 溶液Ⅱ: 0.2mol/L NaOH(临用前用10mol/L贮存液现用现稀释）1％ＳＤＳ 盖紧瓶盖，缓缓颠倒离心瓶数次，以充分混匀内容物。于室温放置5-10分钟。当溶液的pH值低于8.0时，溶菌酶不能有效工作。防止NaOH接触空气中的CO2所以要现用现配。
3、 溶液Ⅲ：5mol/L乙酸钾 60ml 冰乙酸 11.5ml 水 28.5ml。所配成的溶液对钾是３mol/L，对乙酸根是5mol/L。
4、 溶菌酶溶液: 10mg/ml,溶于10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)。
试验步骤：1、 将冼过的500ml 培养物的细菌沉淀物,重悬于10ml（18ml）溶液Ｉ中。
2、 加1ml(2ml)新配制的溶菌酶溶液。
3、 加20ml(40ml)新配制的溶液Ⅱ。
4、 加15nl(20ml)用冰预冷的溶液Ⅲ。封住瓶口，摇动离心瓶数次以混匀内容物，此时应不再出现分明的两个液相。于冰上放置10min，会出现一白色絮状沉淀。沉淀应包括染色体ＤＮＡ、 高分子量ＲＮＡ和钾－ＳＤＳ－蛋白质－膜复合物。
5、 用ＳorvallＧＳ3转头（或与其相当的转头）于４℃以4000rpm离心15min，使转头自然停止转动。如果细菌碎片贴壁不紧，则可以5000rpm再度离心20min， 然后尽可能将上清全部转到另一瓶中，弃去残留在离心管内的粘稠状液体。未能形成致密沉淀块通常是由于溶液Ⅲ与细菌裂解物混合不充分。
6、 用４层干酪包布把上清过滤至一250ml离心瓶中，加0.6体积的异丙醇，充分混匀，于室温放置10min。
7、 用Ｓorvall GS3转头（或与其相当的转头）于室温以500rpm离心15min，回收核酸。盐也会在４℃离心时沉淀下来。
8、 小心倒掉上清，敞开瓶口倒置离心瓶使残余上清液流尽，室温下用70％乙醇洗涤沉淀。倒出乙醇，并除去附于瓶壁的所有液滴，室温下将瓶倒置放在纸巾上，使最后残余的痕量乙醇挥发完全。
9、 用3ml TE(pH8.0)溶解核酸沉淀。
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