* 效果可能不可预测
** 添加10% DMSO时,Taq DNA聚合酶的活性会被抑制47%,因此反应加大Taq DNA聚合酶的用量(即5U)予以补偿
*** Perkin Elmer, Norwalk, Connecticut
表2-2 可改变以提高PCR产物的特异性和/或产量的循环参数
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反应条件 |
提高产量 |
提高特异性 |
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循环数 |
最多35个 |
减至25个 |
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变性* |
增至1 min |
- |
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引物退火** |
降至 |
升至 |
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引物延伸*** |
在后期循环中延长 |
维持30s |