引物合成介绍及常见问题
点击：   作者：   来源：  时间： 2007-03-07 　本站论坛
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诊断PCR扩增	< 40base	OPC, PAGE
DNA测序	20base左右	OPC
亚克隆，点突变等	根据实验要求定	OPC, PAGE，HPLC
基因构建（全基因合成）	根据实验要求定	PAGE
反义核酸	根据实验要求定	PAGE
修饰引物	根据实验要求定	PAGE, HPLC

6.最长可以合成多长的引物？

答：引物越长，出现问题的概率就越大。我们合成过120base的引物，但是产率很低。除非需要，建议合成片段长度不要超过80mer,按照目前的引物合成效率，80mer的粗产品，全长（还不一定正确）引物的百分比不会超过40%，后续处理还有丢失很多，最后的产量是很低。

7.需要合成多少OD数？

答：根据实验目的确定。一般PCR扩增，2 OD引物，可以做200-500次50ul标准PCR反应。如果是做基因拼接或退火后做连接，1 OD就足够了。但是有些研究人员，就做几次PCR，但是却要5-10 OD。做全基因构建的引物都比较长，但是我们有些研究人员也要求高OD数。片段越长, 最后全长得率就越低，出错的几率就越大。超出需要之外的OD数要求，其实也是对社会资源的一种浪费，同时也从一个侧面反映了部分研究人员，特别是新手的自信心不足，总觉得需要重复多次才能成功。

8.如何检测引物的纯度？

答：实验室方便的作法是用PAGE方法。使用加有7M