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血液中提取总RNA的方法

点击： 作者： 来源： 时间： 2006-11-07 　本站论坛

1、抗凝血样品加等倍体积的生理盐水，吹打混匀。
2、在空离心管中加4ML淋巴细胞分离液。
3、在倾斜45度角缓慢的把血液加入淋巴细胞分离液上层使之分层。
4、离心2500rpm，25min，4度
5、小心吸出中层的白细胞层至一新的EP管中加5倍体积的生理盐水。
6、离心1500rpm，15min，4度
7、尽量吸完上层液体，留沉淀加750mlTRIZOL吹打混匀移至1.5mlEP管中室温放置5min。
我使用的都是自己泡过DEPC的东西，乙醇也是。
8、150ul氯仿剧烈振荡20s，冰浴2～3min
9、 12000rpm离心 15min，4度
4 取上层水相
5 加入等体积异丙醇摇匀冰浴静置10min
6 12000rpm 离心 15min，4度
7 75％乙醇 1ml沉淀
8 900rpm 离心 5min，4度
9 弃上清室温干燥10min
10 3ulDEPC水溶解沉淀

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