多酚类植物(苹果,棉花)提取RNA protocol
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多酚类植物(苹果,棉花)提取RNA protocol

点击:   作者:   来源:dxy  时间: 2007-03-10  本站论坛

苹果棉花等多酚类植物提取RNA用TRIZOL一般提不出来
提取的RNA纯度不是特别高,但是用作northern是足够的了

多酚类植物的RNA提取

○1
1.5ml离心管用液N2冷冻吼加入0.1g样品,立即加入500ul酚氯仿,再加入500ul提取buffer,剧烈振荡1-2min,冰上放置5min.
○2
4度12000rpm离心15min, 上清转入新管,加氯仿异戊醇抽提一次
○3
取600ul异丙醇,-20度沉淀20min.
○4
12000rpm离心10min
○5
沉淀用70度乙醇洗
○6
8000rpm 5min
○7
沉淀晾干,溶于30ulDEPC水

附提取buffer 200ml

NaCl 1.1688g 100mM
Tris 2.4228g 10mM (tris-HCl 8.0)
EDTA 5.8450g 10mM
SDS 2.0000g 1%

NaOH调至8.0,定至200ml,加200ulDEPC融解.


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