体液病毒DNA、病毒RNA小量制备试剂盒质检流程

1.抽检方式：从每批次生产的成品中抽取1‰样品进行检验，如该批次生产的产品少于1000盒，抽取一盒作性能检验。
2.检验要求：
2.1体液病毒DNA／病毒RNA小量制备试剂盒组成：见产品说明书。
2.2组成核酸纯化试剂盒的塑料耗材的要求详见Q／WTJ-J01 00002。
2.3使用性能要求：
2.3.1制备的病毒RNA可成功地用于病毒RNA的RT-PCR的扩增。
2.3.2制备的病毒DNA可成功地用于病毒DNA的PCR的扩增。
3. 试验方法：
3.1核酸纯化试剂盒的使用性能要求的试验方法：
3.1.1性能要求2.3.1试验方法：
用核酸纯化试剂盒纯化用猪血清稀释到100微升的1微升甲肝病毒疫苗中的甲肝病毒RNA。
取9 µl 纯化的甲肝病毒RNA、阴性对照、阳性对照RNA按下列条件进行RT-PCR扩增：
逆转录：9 µl 纯化的RNA模板 2 µl 随机引物(稀释到0.1 µg/µl) 20 µl 石蜡油

分别取5µl用纯化的甲肝病毒RNA、阴性对照、阳性对照RNA RT-PCR扩增出的DNA走1.6％琼脂糖凝胶电泳，目测RT-PCR扩增是否成功。

备注：甲肝引物：primer 1: 5’-CAG CAC ATC AGA AAG GTG AG-3’
甲肝引物：primer 2: 5’-CCT CCA GAA TCA TCT CCA AC-3’

3.1.2性能要求2.3.2试验方法：
用核酸纯化试剂盒纯化用猪血清稀释到100微升的1微升乙肝病毒疫苗中的乙肝病毒DNA。取9 µl 纯化的乙肝病毒DNA、阴性对照、阳性对照的DNA按下列条件进行PCR扩增：
逆转录：9 µl 纯化的DNA模板 2 µl 随机引物(稀释到0.1 µg/µl) 20 µl 石蜡油

分别取5µl用纯化的乙肝病毒DNA、阴性对照、阳性对照DNA PCR扩增出的DNA走1.6％琼脂糖凝胶电泳，目测PCR扩增是否成功。
备注：乙肝引物：nt2823-2845: 5’-TCA CCA TAT TCT TGG GAA CAA GA-3’
乙肝引物：nt685-704: 5’-CGA ACC ACT GAA CAA ATG GC-3’

4.判定规则：
抽检发现不合格项，可再抽取三盒试剂盒进行检验，如果新抽取的三盒均检验合格，判定该批产品为合格产品。三盒产品中只要有一盒以上的产品检验为不合格的，则判定该批产品为不合格产品。