低得率 A.样品裂解或匀浆处理不彻底
B.最后得到的
RNA沉淀未完全溶解 A260/A280<1.65
A.检测吸光度时,RNA样品不是溶于TE,而 是溶于水。低离子浓度和低pH条件下,A280值会较高。
B.样品匀浆时加的试剂量太少。
C.匀浆后样品未在室温放置5分钟。
D.水相中混有有机相。
E.最后得到的RNA沉淀未完全溶解。
RNA降解 A.组织取出后没有马上处理或冷冻
B.样品或提取的RNA沉淀保存于-5--20℃,未在-60--70℃保存。
C.细胞在胰酶处理时被破坏。
D.溶液或离心管未经RNase去除处理。
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