多酚类植物的RNA提取: 苹果棉花等多酚类植物提取RNA用TRIZOL一般提不出来。这个方法是验证过有效的,提取的RNA纯度不是特别高,但是用作northern足够。 实验试剂: 提取buffer 200ml:NaCl 1.1688g 100mM Tris 2.4228g 10mM (tris-HCl 8.0) EDTA 5.8450g 10mM SDS 2.0000g 1% NaOH调至8.0,定至200ml,加200ulDEPC融解. 试验步骤: 1、 1.5ml离心管用液N2冷冻吼加入0.1g样品,立即加入500ul酚氯仿,再加入500ul提取buffer,剧烈振荡1-2min,冰上放置5min。 2、 4度12000rpm离心15min, 上清转入新管,加氯仿异戊醇抽提一次。 3、 取600ul异丙醇,-20度沉淀20min. 4、 12000rpm离心10min。 5、 沉淀用70度乙醇洗。 6、 8000rpm 5min。 7、 沉淀晾干,溶于30ulDEPC水。
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