植物RNA提取中的一些特殊方法
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植物RNA提取中的一些特殊方法

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-10-24  本站论坛
多酚类植物的RNA提取:
   苹果棉花等多酚类植物提取RNA用TRIZOL一般提不出来。这个方法是验证过有效的,提取的RNA纯度不是特别高,但是用作northern足够。
实验试剂:
提取buffer 200ml:NaCl 1.1688g 100mM  Tris 2.4228g 10mM (tris-HCl 8.0)   EDTA 5.8450g 10mM   SDS 2.0000g 1%  NaOH调至8.0,定至200ml,加200ulDEPC融解.
试验步骤:
1、 1.5ml离心管用液N2冷冻吼加入0.1g样品,立即加入500ul酚氯仿,再加入500ul提取buffer,剧烈振荡1-2min,冰上放置5min。
2、 4度12000rpm离心15min, 上清转入新管,加氯仿异戊醇抽提一次。
3、 取600ul异丙醇,-20度沉淀20min.
4、 12000rpm离心10min。
5、 沉淀用70度乙醇洗。
6、 8000rpm 5min。
7、 沉淀晾干,溶于30ulDEPC水。 

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