分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁,要采取专门的细胞破碎方法。
表各种组织适用的细胞破碎方法
细胞破碎方法
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组织种类
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旋刀式匀浆
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大多数动植物组织
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手动式匀浆
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柔软的动物组织
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超声
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细胞混悬液
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高速匀浆
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细菌、酵母植物细胞
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研磨
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细菌、植物细胞
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高速珠磨
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细胞混悬液
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酶溶
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细菌、酵母
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去垢剂渗透
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组织培养细胞
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有机溶剂渗透
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细菌、酵母
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低渗裂解
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红细胞、细菌
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冻融裂解
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培养细胞
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