在基因功能研究过程中,常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达( transient expression ),以流式细胞仪检测细胞周期的变化,观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同,转基因的效率也不同,往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因
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  • 表达EGFP的质粒和目的基因共转染用于检测目的基因对细胞周期的影响

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2007-12-17    本站论坛
pCMVEGFPspectrin质粒转基因细胞经固定处理后GFP阳性细胞较对照组有轻度下降,但是仍维持较高的水平。pEGFPN-1转基因细胞经处理后,GFP阳性细胞较对照组明显下降。

2.2 pSP72质粒和绿色荧光蛋白基因共转染后细胞周期的检测结果

由于三种质粒中pBB14pCMVEGFPspectrin75%乙醇固定处理后GFP阳性细胞与对照细胞没有显著下降,因此,我们认为这两种质粒适合于共转染细胞,观察目的基因对细胞周期的影响。我们以未含外源基因的pSP72质粒和pBB14pCMVEGFPspectrin共转染293细胞或NIH3T3细胞建立了这种方法,典型的检测结果见图2

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