实验内容
普通光学显微镜的使用
细菌基本形态和特殊结构的观察
细菌标本染色检查法 （革兰氏染色法）
细菌动力检查法（悬滴法、压滴法）
目的要求
了解细菌的基本形态及其特殊结构。
基本掌握显微镜的使用和保养。
掌握接种环的使用及菌液的采取法。
掌握细菌涂片的制备及革兰氏染色方法。
熟悉细菌动力检查法。
一、普通光学显微镜的使用
显微镜的构造图
显微镜的使用方法
油镜头的辨认
显微镜的维护
油镜加香柏油的原理
玻璃折射率：
n=1.52
香柏油折射率：
n=1.515
二、细菌基本形态和特殊结构的观察 使用显微镜的油镜观察各示教片，比较各菌的形态、大小、排列等；注意芽胞在菌体上的位置、大小；鞭毛形态、数最及其位置；荚膜的大小及其与菌体的关系，将观察结果画在实验报告上。
1.细菌的三种基本形态（示教）
球菌：链球菌、葡萄球菌。
杆菌：大肠杆菌。
螺形菌：霍乱弧菌。
上述示教镜各一台/每室
细菌的三种基本形态示意图
葡萄球菌：
Figure 1 - A Gram stain of Gram Staphylococcus cells.
链球菌
杆菌(bacillus)
Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells
弧菌
2.细菌的特殊结构观察（示教）
芽胞示教片：破伤风杆菌。
鞭毛示教片：变形杆菌。
荚膜示教片：肺炎双球菌。
上述示教镜各一台/每室
芽胞
鞭毛
荚膜的观察：
三、细菌标本染色检查法
常采用美蓝，结晶紫等碱性染料进行染色。多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型：
碱性染料（basic dye）—带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。
酸性染料（Acid dye）—带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。
细菌染色法:
负染色
简单染色
（一）细菌涂片的制备
一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘得更牢固；
可改变菌体对染料的通透性；
加热固定可杀死细菌，比较安全。
多种标本涂片标记示意图
如多种标本，可用蜡笔在玻片上划为数格，并于玻片的背面，标明标本的编号。
㈡革兰氏染色法（Gram Stain）
初染：滴加结晶紫染液于涂片上，染1分钟，水洗，甩干。
媒染：加卢戈氏碘液，1分钟后水洗，甩干。
脱色：加95％酒精数滴于涂片上，频频摇3～5秒后，斜持玻片，使酒精流去，再加酒精。如此重复2～3次，直至流下的酒精无色或稍呈淡紫色时为止（约30秒钟）。水洗，甩干。
复染：以稀释石炭酸复红染液复染1分钟后，水洗，待干或用吸水纸印干，油镜镜检。
革兰氏染色法
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