30mMTris-Cl,pH7.9,我自己认为这样应该不会有太大影响吧，希望有知情者告知。好让我下次改正。
分析：根据你的描述，看来你是在用Sephadex 26/100做凝胶层析。
1、凝胶层析主要用途有两个，一个是在其分辨率范围内根据分子大小进行分离，常用于蛋白质纯化的最后一步，即精细纯化（polishing），由于样品体积明显影响分离速度和分辨率，故很少用于粗提纯。另一个用途是脱盐/缓冲液置换，即将蛋白或其他大分子量的组分与无机盐等小分子组分分开。常用于不同层析步骤之间的缓冲液置换，使得样品与待使用的缓冲液成分尽量一致。目前Amersham公司的填料中Sephadex G25较常用于这方面。
2、如果你的凝胶柱子用于蛋白质的分离纯化，如我前所提，分辨率至关重要。装柱的效果直接影响分离效果。装得不好的柱子是对填料的浪费，尤其是用好的凝胶。不知道你是否测过这个柱子的柱效？合格的Sephadex G100柱子的每米理论塔板数应在3000－6000之间。如果低于3000，最好重装。
3、平衡也很重要。柱子装完后，要用和上样缓冲液尽量相同的缓冲液平衡，流速也与上样尽量一致，平衡至少
上一篇：Pyrosequencing 原理概述 下一篇：重组Escherichia coli的高密度培养
共20页: 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] 14 [15] [16] [17] [18] [19] [20] 下一页
