蛋白质分离纯化新技术和技术要点
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  • 蛋白质分离纯化新技术和技术要点

  • 点击:    作者:   来源:诺贝尔学术论坛 日期:2008-01-14    本站论坛
DEAE-纤维互素。

第一,手工装柱一般只适宜于大量蛋白质的提取。分子筛柱一般在盐析以后用效率才高,因为它的分媛实汀R话阄叶荚蕹捎茫龋校蹋弥颍疲校蹋弥?Gelfitration column).如果手工装柱,长度应是内径的60-80倍,一般柱长应在1.2-2米,对于软胶,走一次柱须12小时以上,对硬胶,也需5-6小时。

第二,仪器检测器灵敏度调整:最重要的是确定仪器工作正常,信号相应正常。可用在检测器出口通气泡和检测器入口注射有色样品的方法确认仪器正常和估计灵敏度。

第三,均匀, 无气泡,平衡充分,分子筛要注意长度与直径比。测序的蛋白量我用的方法的量是SDS-PAGE v-v%bz

第四,如果是测序的话,SDS-PAGE,把染出的蛋白质带,挖下来.,直接拿去做质谱,只要你有钱国家生物医学分析中心。还有就是要保证挖的是一个蛋白质带,不能含杂蛋白质的

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