酶联免疫吸附试验及其应用

包被抗原：

同左

2

洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟

同左

同左

同左

3

加被检标本：每凹孔加入用含有0.05%吐温-20的稀释缓冲液稀释的被检血清各0.2ml，37℃，作用1～2小时

每凹孔加入0.2ml用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，37℃作用1～2小时。

分2组,a组加酶标记抗原和被检抗原混合液0.2ml，另一组只加酶标记抗原液0.2ml，37℃作用1～2小时。（混合液可作成不同稀释度）。

a组加参考抗体和被检抗原混合液0.2ml，另一组加参考抗体与等量稀释剂0.2ml，37℃作用1～2小时。

4

洗涤：重复2

同左

洗涤：同左

洗涤

5

加入酶结合物：每凹孔加入稀释缓冲液稀释的酶结合物0.2ml 37℃作用1～2小时

加入0.2ml用稀释缓冲液稀释的酶标记特异性抗体溶液，37℃作用1～2小时或由预试实验确定作用时间。

各加入0.2ml抗参考抗体的酶结合物37℃作用1～2小时

方法

步骤

间接法（测抗体）

双抗体夹心法

（测抗原）