克隆抗体,临床应用来作鉴别诊断的有:鉴别癌与内癌,前者阴性,后者阳性;鉴别小细胞性肿瘤,这时应多用几种抗体,如CK,LCA和Vim,如为淋巴瘤,尤文氏瘤或神经母细胞瘤,Vim为阳性;鉴别黑色素瘤和低分化癌时,Vim阳性。
应用Vim检测肿瘤阳性的有:HDR-S细胞,B免疫母细胞形淋巴瘤,浆细胞瘤,T 免疫母细胞及多形性T 淋巴瘤,平滑肌瘤和肉瘤,纤维瘤和肉瘤,脂肪瘤和肉瘤,横纹肌肉瘤,血管瘤,粘液瘤,神经纤维瘤,鞘瘤,恶性神经鞘瘤,恶性纤维组织细胞瘤,纤维组织细胞瘤,恶性巨细胞瘤,间叶肉瘤,骨瘤和骨肉瘤,骨巨细胞瘤,软骨细胞瘤,骨软骨瘤,软骨母细胞瘤,软骨肉瘤,滑膜肉瘤,精原细胞瘤,黑色素瘤和恶性黑色素瘤,脊索瘤癌肉瘤,尤文 氏瘤,脑膜瘤,卵泡膜细胞瘤,颗颗细胞瘤,间皮瘤,等等。
在正常组织中,Vim标记阳性组织的有:
平滑肌和横纹胶肌细胞,肺泡吞噬细胞,血管及内皮细胞,肝脏枯否氏细胞,滑膜细胞,浆细胞,奇形细胞,室管膜细胞,卵巢颗粒细胞,黑色素细胞等。
Vim是目前用来鉴别上皮性肿瘤还是间叶源性铁常用抗体之一,不过,在应用于鉴别肿瘤时,应多选用几种抗体。
Vim的抗体现市售的有几种:
⑴单
克隆小鼠抗Vim
克隆3B4,该抗体稀释度较高,可在1:200,它适用于各种切片,但在使用前必须抗原修复。
⑵
克隆小鼠抗猪Vim,
克隆V9,该抗体较早前使用,从已检测的大量病例情况分析,该抗体效果不错。但该抗体最大的缺点是稀释度较不理想,仅在1:10左右,由于稀释度不大,标记的例数较少,成本较高,现已较少使用。
⒉ Von Willebrand因子
这种抗体在旧叫法中被称为第Ⅷ因子相关抗原,如今被 称为Von Willebrand因子,它可在各种内皮细胞和巨核细胞的胞浆中找到,因此在临床的应用中,它常被用来检测由内皮细胞来源的各种肿瘤,同时也用来检测骨髓标本中巨核细胞的增殖。该抗体使用前须做抗原修复。注意抗体有单抗 及多抗之分。
⒊CD34
该抗体被认为是一种稳定的,可靠的血管内皮细胞及其来源的肿瘤的标记物。它对毛细血管,小血管内皮细胞显示强阳性,对中至大血管内皮细胞量选择性阳性,对软组织肿瘤,肿瘤 毛细血管,血管管和血管肉瘤的内皮细胞呈阳性,对淋巴管内皮阴性。使用时须做 抗原修复。
⒋CD31
该抗体与CD34的标记范围基本一样。
(三)肌组织及其相关肿瘤的常用抗体
1. 肌间线蛋白(Desmin,DM)
在横纹肌的微细结构中,有明暗带之分,在明暗带的中央有一薄膜称为工膜。在心肌纤维结构中,也有相似的工膜。这些结构的主要成份就是由肌间线蛋白构成的。此外,在心肌的闰盘,平滑肌中,也含有肌间线蛋白。
Desmin为一种中间丝蛋白,正常时可分布于平滑肌细胞,心肌细胞骨骼骨细胞和肌上皮细胞。临床应用时常用来检测上述细胞来源的肿瘤如子宫肌瘤及肉瘤,胃,肠道 肌源性肿瘤各形,横纹肌肉瘤和肌上皮瘤等。
该抗体适应于各种组织切片,经抗原修复后结果更佳。
2.肌球蛋白(Myosin)
骨髓肌的微细结构在电镜下可见到肌原纤维是由1-2千条平行的肌丝集成的来组成,肌丝分为粗肌丝和细肌丝两种。粗肌丝由许多豆芽状的肌球蛋白组成。在心肌和平滑肌发育分化中期,也可见到肌球蛋白。
目前,临床应用的有两种抗体。
① Myosin(skeletal)
这种抗体用于检测骨髓肌及其来源的肿瘤它适合于各种切片,抗原修复后结果更好。
② Myosin(smooth Muscle)
这种抗体用于检测肌上皮及平滑肌细胞以及这方面来源的肿瘤,它适合于各种组织切片,抗原修复后可获得更好的结果。
3.肌动蛋白(Actin) 肌原纤维由两种成分组成,细肌丝和粗肌丝。细肌丝则由肌动蛋白,原肌球蛋白和肌原蛋白三种成分组成,其中的肌动蛋白,其分子呈球状,它们互相连接形成长链,每一条细肌丝都由两条肌动蛋白分子所构成。
现临床用于检测肌动蛋白的抗体有如下几种:
①单
克隆小鼠抗人肌动蛋白,
克隆为HHF35。它是一种广谱标记抗体,既可以用于检测骨髓肌和骨髓肌来源的肿瘤,也可以用于检测平滑肌,血管平滑肌,心肌,肌上皮细胞及其来源的肿瘤,它适合各种组织切片,不用微波抗原修复,也能获得很好的结果。稀释度为1:100。
②单
克隆小鼠抗人肌动蛋白(平滑肌)
克隆为1A4。该抗体主要用于检测平滑肌,心肌,血管平滑肌,肌上皮细胞及其来源的各种肿瘤,实验证明,毛细血管也可被清楚地显示出来。它适合各种切片,稀释度为1:100。
(四)淋巴组织及相关肿瘤检测的常用抗体
淋巴组织的肿瘤成分较为复杂,有些与其它上皮来源的肿瘤在形态上较相似,鉴别较困难。因而免疫组化对淋巴组织肿瘤的定性较准确。淋巴瘤是原发于淋巴结和淋巴结以外各种淋巴组织的恶性肿瘤。根据瘤细胞的形态和结构不同,把它们分成两大类即何杰金病(Hodgkins disease,HD)和非何杰金淋巴瘤,(Non-hodgkins lymphoma,NHL)。
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