应用抗体来检测淋巴瘤的抗体目前有很多,光CD系列就有百余种,虽然各类繁多,但临床常用的抗体,主要有以下几种:
1.LCA(Leucoyte common antigen) 该抗体主要用于检测正常白细胞即淋巴细胞(T.B),粒细胞,组织细胞和单核细胞及其来源的肿瘤。适合各种切片,不需特别处理。稀释度1:200。
2.T细胞 T淋巴细胞在胸腺中进行分裂分化,形成了具有各种特异性抗原受体的T细胞,因此它又被 称为胸腺依赖细胞。T细胞数量最多,功能又是多方面的根据它们的功能可将其分为 辅助T细胞,抑制T细胞和细胞毒性T细胞。
T淋巴细胞在淋巴结的分布通常在副皮质区,因此免疫组化显色后,在副皮质区可找到阳性细胞,临床常用的有两种抗体。
①T细胞,CD45RO
克隆为人WHL-1
该抗体几乎可标记所有的胸腺细胞还可检测CD4和CD8以及成熟活化T细胞的静止T细胞亚群及其来源的淋巴瘤细胞,该抗体适合于各种切片,不需各种处理方法,仍可获得很好的结果,稀释度为1:100。
②T 细胞,CD3,
克隆为PS1
该抗体用来检测正常和新生的T细胞,对早期的T细胞有较高的特异性。虽然它的特异性较高,但敏感性不如①号抗体。临床应用时,可两种抗体同时应用,以利于提高诊断的准确率。它不需各种方法处理。稀释度为1:100。
3.B细胞,CD20 克隆为L26 B淋巴细胞跟T淋巴细胞不一样,它的分化分裂是在胚胎肝及骨髓内进行。根据实验,在淋巴结中的B淋巴细胞,主要分布在滤泡反应中心。经实验证明,反应中心是B细胞各个时期转化的场所,基本上需经四个时期:
第一期成熟的小淋巴细胞接受抗原信息后体积逐渐增大,细胞核表面出现凹陷或沟纹似裂隙被称为小核裂细胞。第二期细胞继续增大,核周围有少量胞浆,如此被 称为大核裂细胞。第三期核逐渐变化发展,成为圆形或椭圆形,裂 纹也随着变化而消失,核内出现核仁,胞浆增多,
RNA和蛋白质合成相继增多,此时被称为小无核裂细胞。第四期,细胞继续增大,比原来的小淋巴细胞大好几倍,核呈圆形或椭圆形,可见核分裂,胞浆丰富,被 称为大无核 裂细胞。由于B细胞在不同时期的变化,因此在标记时,应使用不同类型的抗体,对其不同时期进行标记和判断。
在临床应用中,检测淋淋巴瘤不象研究淋巴瘤,那样细致,只要将其分形就可以了。
该抗体不需特殊处理,稀释度为1:100。
4.骨髓组织细胞抗原,克隆:Mac387 应用抗体的呈色可将淋巴瘤分为三大类形即T、B淋巴细胞形和组织细胞形。该抗体可检测正常的粒细胞,血液中单核细胞和组织中的组织细胞及其来源的肿瘤。
该抗体不需特殊的处理方法,稀释度为1:100。
5.CD29 该抗体主要用于标记B 细胞主要用于,B细胞淋巴瘤,B细胞白血病等的鉴别诊断,标记时应做抗原修复。
6.CD56
(五)神经和神经内分泌及其有关肿瘤抗体
1.神经无特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)
经研究发现脑组织中有三种同2酶即dd.dr和rr。NSE属于rr形。它不仅存在于神经细胞及其轴突中,而且存在于各种内分泌细胞及其有关肿瘤细胞内。有人做过实验,应用NSE检测69例APUD系统肿瘤,均表达为阳性,在16例外分泌腺如胰腺癌的检测中 仅有2例阳性。可见NSE对于检测APUD系统方面的肿瘤是一个很有用的抗体。它适合于各种组织切片,有单克隆和多克隆两种抗体,应用抗原修复,可获得更佳结果。
2.嗜铬蛋白A(chromogranin A)
该抗体可检测 神经无和 神经内分泌细胞及其来源的肿瘤如:嗜铬细胞瘤,甲状腺髓样癌,胰岛细胞瘤,垂体肿瘤,类癌等。抗体分为单抗 和多抗,可适合于各类切片,需做抗原修复。
3. 胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrilary acidic protein,GFAP)克隆为6F2
GFAP是中间丝蛋白之一,是星形细胞和室管膜细胞及其来源肿瘤的有效标记物,据对60例星形细胞瘤的免疫组化显示,其结果均为阳性。因此,它是星形胶质细胞瘤和室 管膜瘤的首选抗体。早期使用的有多克隆抗体,近来使用的为单克隆抗体,不需要作任何的处理,适应于各种切片。
4.S-100
S-100是从牛脑中分离出来的一种蛋白,经大量的研究发现。它有三种亚形,S-100ao、S-100a和S-100b。它在人的雪旺氏细胞,室管膜细胞,星形细胞, 神经纤维,神经鞘,皮肤黑色素细胞等都可检测到。因此,它可用于检测上述组织及其来源的肿瘤。
该抗体适合于各种切片,不需任何处理,可获很好结果。稀释度为1:200,应尽量控制背景。
(六)其它
1.甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)克隆为2H11
TG是甲状腺滤泡细胞合成的一种糖白,由于它的特殊关系,是众多抗体中特异性较高的一种抗体,仅用于检测甲状腺组织及其来源的肿瘤,不需任何处理,可获很好结果,适应于各种切片,但应请注意控制背景。
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