免疫细胞化学常用试剂-缓冲液
网站地图本站论坛
高级搜索收藏本站
 
 当前位置:试验方案>蛋白试验>免疫学> 正文

免疫细胞化学常用试剂-缓冲液

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-11-02  本站论坛

  6Tris-TBS(PBS)

  试剂:Triton X-100       10ml(1%)或3ml(0.3%)

  0.5mol/L Tris缓冲液(pH7.6)  1000ml(50ml)或(0.2mol/L的PB)

  NaCl              8.5~9g

  重蒸水             至1000ml

  配制方法:先以重蒸水少许溶解NaCl后,加入Triton X-100及Tris缓冲液或(PB),最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀。

  该液常用浓度为1%及0.3%,前者主要用于漂洗标本,后者主要用于稀释血清。

  7.0.1mol/L(pH7.4)二甲胂酸缓冲液

  试剂:0.2mol/L二甲胂酸钠      500ml

  0.1N HCl              28ml

  蒸馏水               至1000ml

  配制方法:先称取二甲胂酸钠(MW:214)42.8g,加蒸馏水至1000ml,使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液;再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ,配成0.1N,最后取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合,加蒸馏水至1000ml,即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。

 8.几种常用的不同pH值缓冲液的配制表

  (1)0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)

pH

0.2mol/L NaH2PO4(ml)

0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7

93.5

6.5

5.8

92.0

8.0

5.9

90.0

10.0

6.0

87.7

12.3

6.1

85.0

15.0

6.2

81.5

18.5

6.3

77.5

22.5

6.4

73.5

26.5

6.5

68.5

31.5

6.6

62.5

37.5

6.7

56.5

43.5

6.8

51.0

49.0

6.9

45.0

55.0

7.0

39.0

61.0

7.1

33.0

67.0

7.2

28.0

72.0

7.3

23.0

67.0

7.4

19.0

81.0

7.5

16.0

84.0

7.6

13.0

87.0

7.7

10.5

89.5

7.8

8.5

91.5

7.9

7.0

93.0

8.0

5.3

94.7

  (2)0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)

pH

0.2mol/L Tris(ml)

0.2mol/L HCl(ml)

H2O

7.19

10.0

18.0

12.0

7.36

10.0

17.0

13.0

7.54

10.0

16.0

14.0

7.66

10.0

14.0

15.0

7.77

10.0

14.0

16.0

7.87

10.0

13.0

17.0

7.96

10.0

12.0

18.0

8.05

10.0

11.0

19.0

8.14

10.0

10.0

20.0

8.23

10.0

9.0

21.0

8.32

10.0

8.0

22.0

8.41

10.0

7.0

23.0

8.51

10.0

6.0

24.0

8.62

10.0

5.0

25.0

8.74

10.0

4.0

26.0

8.92

10.0

3.0

27.0

9.10

10.0

2.0

28.0

  (3)0.2mol/L醋酸盐缓冲液(pH3.6~5.6)

pH

0.2mol/L醋酸(ml)

0.2mol/L醋酸钠(ml)

3.6

46.3

3.7

3.8

44.0

6.0

4.0

41.0

9.0

4.2

36.8

13.2

4.4

30.5

19.5

4.6

25.5

24.5

4.8

20.0

30.0

5.0

14.8

35.2

5.2

10.5

39.5

5.4

8.8

41.2

5.6

4.8

45.2

  (4)0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液(pH5.0~7.4)

pH

0.2mol/L二甲胂酸钠(ml)

0.2N HCl(ml)

蒸馏水

5.0

25

23.5

51.5

5.2

25

22.5

52.5

5.4

25

21.5

53.5

5.6

25

19.6

55.5

5.8

25

17.4

57.5

6.0

25

14.8

60.3

6.2

25

11.9

63.1

6.4

25

9.2

65.8

6.6

25

6.7

68.3

6.8

25

4.7

70.3

7.0

25

3.2

71.8

7.2

25

2.1

72.9

7.4

25

1.4

73.6

  注:HCI可由NCO3代替,配制成二甲胂酸钠-HNO3缓冲液。

  (5)0.2mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7)

pH

0.2mol/L Na2CO3(ml)

0.2mol/L NaHCO3(ml)

9.2

4.0

46.0

9.3

7.5

42.5

9.4

9.5

40.5

9.5

13.0

37.0

9.6

16.0

34.0

9.7

19.5