免疫细胞化学常用试剂－显色液

　　配制方法：先将4-Cl-1-萘酚加入DMF中，加热溶解使呈乳白色，再加入TB，乳白色变为絮状，在7.5℃加热5min后加入H2O2，搅动使絮状消失，趁热过滤，当降至略低于50℃时才放入组织标本（注意：温度过高易损伤标本，过低则易重新出现沉淀）。显色时间通常为5min左右。

　　4-Cl-1-萘酚的终产物显示蓝色。

　　多数认为最好去除白色沉淀（如上述），但Larsson等认为，白色沉淀可作为背景，使阳性部位更易观察。由于酒精可溶解4-Cl-1-萘酚显色的组织标本，勿用酒精脱水。

　　3．3-氨基-9-乙基卡唑（3-amino-9-ethylcarbozole,AEC）显色液

　　试剂：AEC　　　　　　　　　　　20mg

　　二甲基甲酰胺（DMF）　　　　　　2.5ml

　　0.05mol/L醋酸缓冲液（pH5.5）　　50ml

　　30%H2O2　　　　　　　　　　　　25ml

　　配制方法：先将AEC溶于DMF中，再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前，加入30%H2O2。切片显色时间为5～20min。

　　该显色液作用后，阳性部分呈深红色，加以苏木精或亮绿等作为背景染色，则效果更佳。由于终产物溶于酒精和水，故需用甘油封固。

　　4．TMB显色液

　　试剂：TMB

　　HCl

　　亚硝基铁氰化钾

　　无水酒精

　　配制方法：

　　（1）醋酸盐缓冲液：取1.0mol/L的HCl 190ml加入1.0mol/L的醋酸钠400ml中混合，再加蒸馏水稀释至1000ml，用醋酸或NaOH将pH调至3.3。

　　（2）A液：取上述缓冲液5ml，溶解100mg亚硝基铁氰化钾，加蒸馏水92.5ml混合。