细菌染色体DNA的大量提取和纯化

细菌染色体DNA的大量提取和纯化

1. 接单菌落于20 mL液体培养基中，适当温度条件，高转速培养8～10 h；
2. 菌液转至50 mL离心管，8000 rpm，5 min离心收集菌体；
3. 用适量TE洗涤菌体，8000 rpm，5 min离心，去除上清；
4. 2 mL TE重悬菌体，转至5 mL离心管，加入溶菌酶（终浓度为10 mg/mL），混匀，37℃，30 min；
5. 加340 uL 10％ SDS，温和混匀，明显见到白色沉淀后加30 uL蛋白酶（10 mg/mL）并温和混匀，65℃消化3～6 h，每半小时轻轻混匀一次，至液体呈现透明状；

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