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果蝇的双因子杂交

点击:   作者:   来源:  时间: 2007-09-25  本站论坛
一、实验目的:
通过两对性状个体杂交,观察F2的分离现象及其比例,了解两对非等位基因间的自由组合。同时掌握果蝇的杂交技术,并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。
 
二、实验材料:
         灰体残翅    EEvgvg
         黑檀体长翅  eeVgVg
 
三、实验原理:
果蝇的灰体基因(E)与黑檀体基因(e)为一对相对性状,位于ⅢR70.7位置,而长翅(Vg)与残翅(vg)为另一对相对性状,位于ⅡR67.0位置。这两对基因是没有连锁关系的,位于不同染色体上的非等位基因。
 根据非等位基因分离的自由组合定律,在F1代产生配子时,非等位基因的分离是独立的,它们彼此自由组合,产生四种基因型的配子(EVg,Evg,eVg,evg),且它们的比例相同。这四种配子自由结合,因此在F2代会出现9种基因型的后代,若显性完全,就出现4种表型,比例为9:3:3:1。
   正交:灰体残翅(♀)×黑檀体长翅(♂)        P
               EEvgvg           eeVgVg
                                 ↓
                             灰体长翅                           F1
                             EeVgvg
                                  ↓  自交
                                  F2

             
EVg  1/4
Evg  1/4
eVg  1/4
Evg  1/4
EVg  1/4
1/16
 
 
 
Evg  1/4
 
 
 
 
eVg  1/4
 
 
 
 
Evg  1/4
 
 
 
 
 

四、实验内容:
1、  选处女蝇:每组做正交1瓶,正交选灰体残翅为母本,黑檀体长翅为父本,将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死,在8-12h内收集处女蝇5只,将处女蝇和5只黑檀体雄蝇转移到新的杂交瓶中,贴好标签,于25℃培养;
2、  7d后,释放杂交亲本;
3、  再过4-5天,F1成蝇出现,在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型;
4、  选取5对F1代果蝇,转入一新培养瓶,于25℃培养,其余F1代果蝇处死;
5、  7d后,处死F1亲本;
6、  再过5d,F2成蝇出现,开始观察记录,连续统计7d;
 
五、备注:
1、保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇;
2、杂交后倒掉亲本时,一定要倒干净,以免造成回交产生实验误差。同样在F1自交后,倒掉F1时一定要倒干净,以免造成F1和F2的混杂产生实验误差。
 
                                  果蝇的双因子杂交实验
F1:
观察结果
统计日期
灰体残翅(♀)×黑檀体长翅(♂)
灰体残翅数
灰体长翅数
黑檀体残翅数
黑檀体长翅数
 
 
 
 
 
F2:
观察结果
统计日期
          (♀)×           (♂)
灰体残翅数
灰体长翅数
黑檀体残翅数
黑檀体长翅数
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
合  计
 
 
 
 
对F2代的统计结果做x2测验:
 
灰体残翅数
灰体长翅数
黑檀体残翅数
黑檀体长翅数
实际观察数(O)
 
 
 
 
预期数(E)
 
 
 
 
偏差(O-E)
 
 
 
 
(O-E)2/E
 
 
 
 
自由度=n-1=
x2=∑(O-E)2/E=

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