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RNA肿瘤病毒的生物化学特性

点击： 作者： 来源： 时间： 2006-11-07 　本站论坛

RNA肿瘤病毒的生物化学特性（一）理化组成　　各种致瘤性RNA病毒具有共同的生化和物理特性，故可视为一个科的病毒。致瘤性RNA病毒的化学组成基本相似，皆含有60-70％蛋白质，30-40％脂类，1-2.5％的核酸和2-4％的碳水化合物（主要为糖蛋白）。蔗糖密度梯度为1.16-1.18/ml，氯化铯密并为1.16-1.21g/ml。对脂溶剂，去污剂和56℃加热30分钟敏感，而对紫外线和X射线高度耐受。可被酸（pH4.5）和福尔马林（1:4000）灭活。可保存于－70℃或更低的低温中。在不同的RNA肿瘤病毒的类核、核壳和被膜中含有一组相对特异的蛋白质和糖蛋白，它们是由病毒基因组内的基因所编码的[2]。在文献上，这种蛋白质和糖蛋白是统一以其英文单词的字首P（Protein）和gp（glycoprotein）来表示的，其后是以千为单位的分子量，如分子量为30000的蛋白质和分子量为71000的糖蛋白分别以P30和gp71表示，磷酸化蛋白质以PP（Phosphylorated protein）来表示。近年来由于各种技术立法的发展，一些RNA肿瘤病毒基因组内的复制基因和肿瘤基因的排列位置、结构和其编码产物已逐步搞清，使研究工作全面进入分子水平。（二）应用酚提取可得两个主要成分　　沉淀快的60-70S和沉淀慢的4-5S，此外尚有少量的28S、18S和7S的RNA。这些都是单股的RNA，对胰核酸酶敏感而可分解。　　1．60-70SRNA这是B型和C型病毒颗粒中核酸的主要成分，分子量为1-2×10⁷dalton。这种RNA为聚集性结构，如加热或用二甲亚砜（DMSO）处理，则使氢键断裂而分解二个30-40S亚单位和更小的亚单位（如SRNA）。　　2．4-5SRNA起tRNA作用，只是在60-70SRNA变性时才能被检测出来。4SRNA与60-70S聚合物中的30-40S亚单位是以H键相结合的，它可能在逆转录酶作用下合成DNA时起引物的作用。28S和18S的RNA大小类似于宿主的RNA，可能是在成熟过程中从宿主摄取的。7SRNA也可能起源于细胞，但功能尚不清楚。（三）蛋白质　　用凝胶过滤和聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法，从不同动物的RNA肿瘤病毒分离出不同分量的蛋白质（P）和糖蛋白（gp）。对禽类、小鼠和灵长类动物的C型病毒的生化研究表明，每一类病毒的被膜和类核都有一组相对特异的P和gp。因此各类RNA肿瘤病毒之间的抗原性也就有一定的差异。（四）酶类　　在提纯的RNA肿瘤病毒中，证明存在有不同的酶，如核糖核酸酶、核苷酸激酶、DNA连接酶、DNA的内切酶和外切酶和外切酶等，特别有意义的是它含有一种DNA多聚酶，在体内、外均能转录病毒性RNA成为DNA，称为依赖RNA多聚酶（RNA－dependent DNA polymerase），即为逆转录酶（reversetranscriptase，RT），分布在病毒的类核内。　　逆转录酶与三种功能有关：继而使RNA－DNA杂交①使RNA－DNA形成杂交物；②物解离出RNA；③进而再生成DNA－DNA的双股链。不同动物的RNA肿瘤病毒类核中的逆转录酶的大小不一致，研究资料指出，禽类的逆转录酶有6．5万的两种成分，而小鼠的则为8万左右分子量的多肽。免疫学研究结果显示B型病毒与C型病毒之间的逆转录酶无交叉反应。人类T细胞白血病病毒Ⅰ型（HTLV－1）的逆转录酶的分子量约为10万，其抗血清与其它动物RNA肿瘤病毒的逆转录酶不发生免疫反应。过去曾认为逆转录酶是RNA肿瘤病毒所特有，但是以后的研究表明，那些没有致瘤性但可以引起感染的绵羊Visna病毒和进行性胸膜肺炎病毒（PPV）也都含有逆转录酶，因此这只是相对的意义。（五）脂类和碳水化合物　　绝大部分脂类分布在病毒的被膜上。禽类和小鼠的病毒还有磷脂。这类病毒中没有游离的碳水化合物，找到的皆是糖蛋白。糖蛋白组成病毒被膜表面的尖突，蛋白酶可使其剥脱，但不破坏病毒的被膜。应该指出的是，被膜上的糖蛋白决定病毒型的抗原特异性，可控制病毒对宿主的感染范围。

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