关于跑DNA ladder的询问
各位朋友：
最近我在做细胞凋亡的形态和生化特征的实验，从普通光镜和AO染色照相来看，有很明显的凋亡，但是用0.8％琼脂糖跑DNAl adder带就是跑不出来，前些日子跑出来过一回，现在就不行了，总是只有一条基因组的DNA，电压110V，约1h。咋回事？会有哪些影响因素啊？
给你一个下面的提取方法：
1.收集经药物处理后的细胞，600g，4度离心10分钟，弃上清，冷PBS洗一次，4度离心10分钟，弃上清。
2.加入200微升lysis buffer(20mM EDTA,Tris,PH8.0,0.8%SDS),轻轻吹打后加入400微克/ml Rnase A，于37度incubate 2小时。
3.加入240微克/ml proteinase K,轻轻混匀，于50度过夜。
4.加入200微升phenol：chloroform, vortex 30 秒。
5.15,000rpm 离心10分钟，将上清150微升移至新tube中。
6.每孔加16微升DNA样品和4微升loading dye,2％琼脂糖凝胶，50v，1小时左右。
造成一条带的原因有很多，比如细胞调亡数，DNA的提取效率，电泳电压等，你可以根据具体情况再优化一下
上一篇：细菌名称英解汉译词典 下一篇：植物RAPD分析技术
