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有丝分裂中期染色体观察

点击： 作者：51protocol收集 来源： 时间： 2007-05-30 　本站论坛

有丝分裂中期染色体观察

一．实验目的：
学习染色体压片的方法，观察有丝分裂各时期的细胞及中期染色体的形态结构。

二．实验原理：
各种生长旺盛的植物组织，常进行着细胞分裂。经过适当的取材处理，加以固定、离析、染色、压片方法，可以迅速地将细胞分散附着在载片和盖片之间，进行有丝分裂和染色体动态观察，是遗传学研究的一种基本方法。

三．实验材料、用具及试剂
实验材料：洋葱根尖
用具：显微镜、解剖器材、载玻片、盖玻片、酒精灯等。
试剂：无水乙醇、70%乙醇、冰醋酸、秋水仙素、改良的苯酚品红、解离液（浓盐酸：95%乙醇 1：1）

四．实验步骤：
1．预处理：将洋葱的鳞基置于盛水的小烧杯上，放在25℃温箱中，待根长到2cm时，在上午九时摘下根尖，放到0.02%秋水仙素溶液中，浸泡处理3-4小时。（浸泡在蒸馏水中4度 24小时）
2．固定：经过前处理的根尖，再放到卡诺固定液中，固定24小时。固定材料可转入70%乙醇中，在4℃冰箱中保存。
3．解离：从固定液中取出根尖，用蒸馏水漂洗，再放到解离液中，室温水解10min。
4．染色压片：将经过解离的根尖用蒸馏水漂洗数次，放在新培养皿里。然后将根尖放到载玻片上，切取根尖分生组织，加1-2滴改良的苯酚品红，静置10min。盖上盖玻片，用吸水纸吸取多余的染料，在酒精灯上缓慢往复3-4次，注意不要沸腾。在载片与盖片之间放一刀片，用解剖针柄轻敲盖片的四角，再用拇指适当用力下压，使材料分散成薄薄的一层。在显微镜下镜检。

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