一、实验原理
随着分子遗传学的发展，转导已成为遗传学分析的常用方法。所谓转导就是利用噬菌体为媒介将一个细胞（供体）的遗传物质传递给另一个细胞（受体）的过程。转导可分为二类：（1）普遍性转导；（2）局限性转导（专一性转导）。本实验以局限性转导为例，用λ噬菌体专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基本原理，并初步掌握转导实验的基本技术。实验中所采用的供体菌株是E.coliK12（λ）gal 。当此细菌受紫外线诱导后，原噬菌体被释放出来，其中有一定比例的噬菌体带有邻近的半乳糖发酵基因，我们称这种噬菌体为转导噬菌体（即λdggal ）。当转导噬菌体（λdggal ）感染受体菌E.coliK12gal-时，少部分（约三分之一）形成稳定的转导子，大部分（约三分之二）以杂基因子的形式形成不稳定的转导子。整个转导过程见图15-1。
三、实验器具和药品
1.用具：培养皿（9厘米），三角瓶（150毫升），试管（15×1.5），离心管，吸管（1毫升、5毫升、10毫升），玻璃涂棒。
2.培养基
（1）肉汤液体培养基：牛肉膏5克，蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升，pH7.0－7.2，高压灭菌15磅15分钟。
（2）加倍肉汤液体培养基（2E）：牛肉膏0.5克，蛋白胨1克，NaCl0.5克，蒸馏水50毫升，pH7.0—7.2，高压灭菌15磅15分钟。
（3）肉汤半固体培养基：肉汤液体培养基中加1％的琼脂。
（4）肉汤固体培养基：肉汤液体培养基中加2％的琼脂。
（5）半乳糖EMB培养基：伊红Y0.4克，美蓝0.06克，半乳糖10克，多胨10克，K2HPO42克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升，pH7.0—7.2，高压灭菌8磅25分钟。
（6）Vogel50×基本培养基（浓缩50倍的基本培养基）：MgSO4·7H2O10克，柠檬酸100克，NaNH4HPO4·4H2O175克
K2HPO4500克，蒸馏水定容1000毫升（配好后放冰箱备用）。
（7）半乳糖基本固体培养基：Vogal50×2毫升，半乳糖2克，优质琼脂粉1.8克，蒸馏水98毫升，pH7.0，高压灭菌8磅25分钟。
（8）磷酸缓冲液：KH2PO42克，K2HPO47克，MgSO4·7H2O0.25克，蒸馏水1000毫升，高压灭菌15磅15分钟。
（9）生理盐水：NaCl8.5克，蒸馏水1000毫升，高压灭菌15磅15分钟。
（10）药品：氯仿。
四、实验说明
1.局限性转导可分为低频转导（LFT）和高频转导（HFT）。从低频转导的转导子中可分离得到用于高频转导的双重溶源化细菌，以双重溶源菌诱导制得λ噬菌体裂解液进行转导试验就称其为高频转导。
在低频转导中，用于转导的λ噬菌体大部分属正常的噬菌体（λ ），只有少数属部分缺失的转导噬菌体（λdggal ）。当大量噬菌体感染受体菌时，大部分受体菌被正常的噬菌体感染裂解死亡。尽管少部分被转导噬菌体感染，由于大量正常噬菌体的存在，往往同时也被正常噬菌体感染裂解死亡，一般认为：只有部分同时感染的细胞，首先λ 通过正常的附着位点整合到受体菌染色体上，然后，λdggal 的杂合附着位点和染色体上的杂合附着位点（由于λ 整合造成）再次整合形成不稳定杂基因子（双重溶源化细菌）整个过程见图15-2：
低频转导的转导频率较低，一般在106的感染细胞中有一个转导子出现。如改用双重溶源菌株进行诱导制备λ裂解液进行转导，情形就不同。由于λ 的存在使得λdg同时成熟，裂解液中就会出现50％正常噬菌体和50％部分缺失的λdggal 转导噬菌体，因此可以得到约50％的转导子，从而大大提高了转导频率。
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