[目的要求]:
1、学习电生理学实验方法。
2、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形,并了解其产生的基本原理。
[基本原理]
神经干在受到有效刺激后,可以产生动作电位,标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动,可以引导出双相的动作电位,如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏,则引导出的动作电位即为单相动作电位。
神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的,所以,神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。
[动物与器材]
蟾蜍、常用手术器械、BL—420E 生物机能实验系统、神经屏蔽盒、任氏液。
[方法与步骤]
1、制备蟾蜍坐骨神经标本
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取一只蟾蜍,双毁髓、去前肢及内脏、剥皮并分离两腿,将一侧后肢固定,
分离一侧后肢的坐骨神经。向上分离坐骨神经 至脊柱根部,向下分离
内侧的胫神经和
外侧的腓神经至踝关节。
结扎坐骨神经干的脊柱端及
胫、腓神经的足端,游离神经干。提起两端结扎线,
将神经干标本放入任氏液中备用。 |
2、实验装置连接
3、将蟾蜍的坐骨神经干标本置于屏蔽盒[图1]内的电极上,神经干的中枢置于刺激电极一侧,从末端引导动作电位[图2]。
4、实验观察与记录
(1)神经干兴奋阈值的测定
刺激强度从0.1V开始,逐渐增加刺激强度 ,当刚刚出现动作电位时的刺激强度,即为神经干的兴奋阈值。
(2)双相动作电位
在刺激阈值的基础上逐渐加大刺激强度,可见动作电位的图形为双相,而且其幅值随刺激强度增大而加大。当刺激增加到一定强度时,可见动作电位的幅值不再增大(图)
(3)动作电位参数的测量
(4)单相动作电位
图1
图2
在两个引导电极之间损伤神经干标本,即可使原来的双相动作电位的下相消失,变为单相;注意上相动作电位的图形有什么变化。
注意:1、实验过程中注意保持标本的活性良好,经常用任氏液湿润之。
2、如果在显示窗上发现动作电位图形倒置,将引导电极位置对换即可。
[思考题]
1、神经干动作电位的图形为什么不是“全或无”的?
2、你测量出来的神经干复合动作电位幅值和图形为什么与细胞内记录的不一样?
3、神经干的动作电位为什么是双相的?在两个引导电极之间损伤标本后,为什么动作电位变为单相?单相(上相)的动作电位形状与双相(有下相)时有何不同?为什么?
4、神经干动作电位的上下相图形的幅值和波形宽度为什么不对称?
5、如何将神经干标本的末梢端置于刺激电极一侧,从中枢端引导动作电位,图形将发生什么样的变化?为什么?
6、如何改变两个引导电极之间的距离,观察双相动作电位的图形会发生什么样的变化?是解释为什么?
7、如果将引导电极距离刺激电极更远一些,动作电位的幅值会变小,这是兴奋传导的衰减吗?试解释原因。
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