(一)组织洗涤 经过固定的组织一般都要洗涤(washing),其目的是清除组织内外残留的固定剂,以免影响脱水等后续过程;防止有些固定剂在组织中发生沉淀或结晶而影响观察。洗涤时最好是从容器的底部入水,再从容器上面缓慢流出,这样2h即可,若为陈旧标本则需24h。 (二
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  • 常规石蜡切片操作

  • 点击:    作者:   来源: 日期:2008-01-08    本站论坛

f.二甲苯Ⅰ1min
g.二甲苯Ⅱ1min
h.滴中性树胶,盖盖玻片
3注意事项
①二甲苯脱蜡时间冬季长些,夏季可短些,为防止脱蜡不净影响染色,脱蜡时间宁长勿短。
②盐酸乙相离分化时间灵活掌握,可以在切片蓝化后镜下观察。
③ 染色后的脱水透明也很重要,若脱水不完全,切会会模糊不清,脱水的乙醇要保持纯度,切片在进入脱水乙醇前尽量把水多去掉。
④若用Harris苏木精液时,染色前要先用一张纸把液体表面的结晶捞去,否则会污染切片。
⑤在脱水透明时,二甲苯一石碳酸的作用利于透明,此步故也可省去。
⑥ HE染色虽是常规染色,但是要制出一张完美的HE切片并不是易事,如两种颜色的深浅对比、与染液的浓度、染液的新旧、染色时间有关,需每位操作者灵活运用。
4染色液的配制
①Gill改良苏木精液
苏 木精2g,无水乙醇250ml,硫酸铝17.6g,蒸馏水750ml,碘酸钠0.2g,冰醋酸20ml。先将苏木精溶于无水乙醇,硫酸铝溶于蒸馏水,再将 两液混合后加碘酸纳,最后加入冰醋酸。此配方为半氧化苏木精液,碘酸纳为氧化剂,硫酸铝为媒染剂,此液不会产生沉淀并很少有氧化膜。
②沉淀酸化伊红丫乙醇液
伊 红丫20g,蒸馏水500ml,浓盐酸10ml。将伊红与蒸馏水混合溶解后加入浓盐酸,搅拌,过夜。过滤、滤液不要,用蒸馏水多次冲洗滤纸中的沉淀,然后 将沉淀物连同滤纸一起入温箱中干燥,用95%乙醇1000ml配成饱和液。使用前取饱和液1份,95%乙醇2~3份,配成染色液。在用此液染色前最好将切 片先在95%乙醇中过一下,以保护染色液。
③盐酸乙醇分化液\70%乙醇99ml加浓盐酸1ml。

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