苏木素、伊红染色,简称HE染色,是组织学技术的常规染色方法。恒定优质
HE切片应该是红蓝相映,层次浓淡均为分明。
一、石蜡切片苏木素一伊红染色法的基本步骤:
脱蜡
(1)二甲苯I 15分钟
(2)二甲苯II(应完全透明) 10分钟
逐级降浓度酒精水化
(3)无水酒精I(变为不透明) 1-2分钟
(4)无水酒精II 1-2分钟
(5)95% 酒精 1-2分钟
(6)80% 酒精 1-2分钟
(7)自来水洗 片刻
染色
(8)蒸馏水 片刻
(9)苏木素液染核 10—15分钟
(10)自来水洗 片刻
(11)1%盐酸酒精分化 0.5—1分钟
(12)流水冲洗 片刻至数小时
(13)碳酸锂饱和水溶液反蓝 1分钟
(14)流水冲洗 15分钟至数小时
(15)复染 0.5%伊红水溶液(对比染色) 2—5分钟
逐级升浓度酒精脱水(若为醇溶伊红可直接人90%酒精)
(16)自来水洗(分化伊红) 片刻
(17)95%酒精I 1-2分钟
(18)95%酒精 II I—2分钟
(I9)无水酒精 I 1—2分钟
(20)无水酒精II l-2分钟
透明
(21)二甲苯I 5—10分钟
(22)二甲苯II 5—10分钟
可作透明度试验:在黑色背景下以光线照于切片如果见有乳白色斑片系脱水不足,需
再行脱水。
封固
(23)盖玻片下封固
结果:胞核呈蓝色,胞浆呈红色,红细胞呈桔红色,其它成分呈深浅不同红色。
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