黑色素是深褐至黑色的颗粒状色素,常见于皮肤色素细胞,恶性黑色素瘤。组织内大量存在时呈棕黑色,易于鉴别。但量少时则需用特殊染色来显示鉴别。
黑色素不能为有机溶剂溶解,但易于用强氧化剂漂白而脱色。另外,黑色素本身具有还原银液的能力。因此,用氨银可以将组织中的黑色素显示黑色。通过铁反应也可将其呈暗蓝色而显示出来。
Fontana氏染色法:
操作方法:
(1) 固定于10%甲醛的组织还能用含铬盐的固定液。
(2) 石蜡切片。
(3) 染色前一般步骤,按照常规进行。
(4) 置切片于蒸馏水中充分洗涤。
(5) 投入下列溶液中,并置于暗处12-18小时。
在5%硝酸银水溶液中滴加氨水,至其沉淀被溶解,然后再加5%硝酸银水溶液数滴,至溶液呈混浊为度。此液最好临用新鲜配制。
(6) 用蒸馏水洗2分钟。
(7) 以0.2%氯化金水溶液增色5-10分钟。
(8) 用蒸馏水洗。
(9) 投入5%硫代硫酸钠2分钟。
(10) 自来水洗。
(11) 如需复杂,可用苏木素—伊红染色法。
(12) 酒精脱水、二甲苯透明、树胶封固。
结果:黑色素呈黑色。
注意事项:
(1) Perls氏溶液临用前新鲜配制,不宜久存再用。
(2) Perls染色过程中,应避免用生锈及其它可能造成铁质的普通水洗,而应用蒸馏水洗。
(3) Fontana氏染色法,切片在氨银溶液中浸染时,需在镜下来鉴别褐控制染色时间,以黑色素呈黑色为度,时间过长,会将脂褐素,橙色血质均染成黑色。
(4) 一般应另用一张切片进行脱黑色素对照。
附:脱黑色素方法:
(1) 切片常规脱蜡入水。
(2) 入0.1%-0.25%高锰酸钾水溶液内2-4小时,水洗再用1%草酸水溶液漂白水洗。或用氯化钾1克,70%酒精50毫升,浓盐酸1毫升,混合脱色液处理2-3小时。镜下控制以细胞内外黑色素完全消失为度。
(3)充分脱水。
(5) 常规脱水封片。
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